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商品簡介
目次

商品簡介

近幾年,我們實驗室在國內外率先利用蠶蛹作為生物反應器進行蛋白藥物產業化研究,開拓了生物製藥的新途徑,尤其是蛋白口服化的研究成果,尤為引人注目。由于目前國際上生物技術工業界常用大腸桿菌和酵母表達制備藥物,這一技術路線從實驗室研究到中試和產業化生產都比較成熟,但對于家蠶生物反應器卻沒有現成的技術路線可能套用。為此,我們對家蠶表達的技術體系、規模化生產工藝、高純度產品的制備技術、產品質控、家蠶表達技術體系安全性評價、製造和質檢標準的制定和蛋白質口服相關的蛋白質功能等關鍵技術均進行了深入的研究,并取得了一定的研究成果。
本書共分為五個章節,主要包括家蠶的分子生物學、核多型角體病毒為載體的昆蟲表達系統、家蠶胚胎細胞系的構建、家蠶生物瓜器及其就用、家蠶生物反應器的應用前景五方面的內容。實現對家蠶生物反應器的系統論述,對推廣和推動家蠶生物反應器產業化具有重要的意義。

目次

第一章 家蠶的分子生物學
 第一節 家蠶的生物學特性
1 生活史
2 蠶的外部形態
3 家蠶的生長與發育
4 養蠶的環境標準
第二節 桿狀病毒基因組學
1 桿狀病毒及其侵染機制
2 桿狀病毒基因組學研究
3 桿狀病毒基因結構與功能
第三節 蠶蛹的小RNA研究
1 蠶蛹小RNA的研究
2 蛹mRNA—like小RNA的研究
第四節 家蠶蛹cDNA文庫的構建和蛋白質組學
1 家蠶蛹cDNA文庫的構建
2 家蠶蛹蛋白質組學
第五節 基於家蠶桿狀病毒表面展示技術的膜蛋白組學
1 基於家蠶桿狀病毒表面展示技術分離膜蛋白的方法
第二章 以核型多角體病毒為載體的昆蟲表達系統
第一節 昆蟲細胞/NPV表達系統的原理和經典操作方法
1 原理
2 轉移載體質粒的構建
3 重組病毒的組建和篩選
 第二節 最新發展的改進型操作方法
1 NPV DNA線性化
2 NPV DNA線性化并刪除0RF1629
在S.cerevisiae中YAC介導的NPV重組
4 在E.coli中轉座子介導的NPV重組
5 體外定點重組
6 Bac to Bac系統
7 桿狀病毒表面展示技術
 第三節 外源基因的表達、轉錄及轉譯后加工
1 真核生物、病毒、細菌、霉菌等多種來源基因的表達
2 轉錄后加工
3 糖基化
4 磷酸化、脂肪酰化和酰胺化
5 蛋白水解
6 細胞內定位和分泌
7 高級結構的形成
 第四節 昆蟲細胞NPV表達系統的優越性和缺陷
1 昆蟲細胞/NPV表達系統的優越性
2 家蠶/BmNPV表達系統相對于Sf細胞/AcMNPV表達系統的優勢
 第五節 BmBacPAK病毒的組建
1 BmBacPAK病毒的組建技術
2 BmBacPAK病毒
 第六節 BmBQcPAK載體病毒在家蠶細胞中進行報告基因的表達
 1 質粒的構建
 第七節 家蠶核型多角體病毒p26基因及同源重復l又hr3的克隆和序列分析
 第八節 家蠶核型多角體病毒同源重復Nhr5的克隆和序列分析
1 BmNPV DNA Kpn I—D片段的克隆及兩端序列分析
2 BmNPV hr5全序列分析
 第九節 BmNPV hr5的重復起始區功能
1 含BmNPV hr5結構的質粒在BmNPV感染的BmN細胞中的復制
2 pBhr5和pBhr5 3質粒在AcMNPV感染的Sf21細胞中的復制
3 AcMNPV的hr序列是一種增強子
4 不同NPV在不同宿主細胞中功能和結構不同
 ……
第三章 家蠶組織細胞系的構建
第四章 家蠶生物反應器及其應用
第五章 家蠶生物反應器的應用前景
第六章 家蠶生物反應器生產生物製品的標準
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