實驗骨傷科學(本科中醫藥類/骨傷方向)（簡體書）

《衛生部"十二五"規劃教材?全國高等中醫藥院校教材?全國高等醫藥教材建設研究會規劃教材:實驗骨傷科學》由全國高等醫藥教材建設研究會、全國高等中醫藥教育教材建設指導委員會的組織規劃的“十二五”全國高等院校中醫藥類骨傷方向教材。

第一章 實驗骨傷科學發展概況
第一節 實驗骨傷科學發展簡史
第二節 實驗骨傷科學的主要內容
一、基礎研究
二、應用研究
三、發展研究
第三節 實驗骨傷科學的研究方法特點
一、實驗骨傷科研究要以中醫藥理論為指導
二、實驗骨傷科研究要與臨床相結合
三、實驗骨傷科研究要整體實驗與離體實驗相結合
四、建立“病”與“證”的動物模型
第二章 實驗骨傷科學的研究思路與方法
第一節 實驗骨傷科學的科研選題
一、選題基本原則
二、選題基本程序
三、選題注意事項
第二節 實驗骨傷科的科研設計
一、科研設計的基本內容
二、科研設計三要素
三、科研設計應遵循的原則
第三節 范例解析
一、題目與立項依據
二、項目的研究目標、研究內容以及擬解決的關鍵問題
三、研究方案及可行性分析
四、項目的特色與創新之處
第三章 骨傷生物學基礎
第一節 骨
一、骨組織細胞與骨基質
二、骨的發生發育
三、影響骨生長發育的因素
第二節 骨骼肌
一、骨骼肌組織
二、骨骼肌的發生發育與再生修復
第三節 軟骨
一、軟骨的組織結構
二、軟骨膜
三、軟骨的類型
四、軟骨的組織發生、生長、退行性變與再生
五、軟骨的損傷修復
六、軟骨組織工程
七、參與軟骨形成的主要基因和信號通路
第四節 椎間盤
一、椎間盤的組織結構
二、椎間盤的血供和神經支配
三、椎間盤的組織發生
四、參與椎間盤形成的主要基因和信號通路
第五節 關節
一、關節的概述
二、滑膜關節的結構
三、滑膜關節的功能
四、滑膜關節發育與形成的過程
五、滑膜關節發生發育的調節
第六節 神經
一、神經系統的發生
二、神經的生長發育
三、神經信息的傳遞
四、神經遞質與神經調質
五、受體與離子通道
第四章 常見骨傷科疾病動物模型
第一節 實驗動物分級標準
第二節 常用實驗動物的品種、特點
一、小鼠
二、大鼠
三、豚鼠
四、家兔
五、犬
第三節 動物實驗基本技術操作方法
一、實驗動物的抓取和固定方法
二、實驗動物的編號標記方法
三、實驗動物的麻醉方法
四、實驗動物的被毛去除方法
五、實驗動物的給藥途徑和方法
六、實驗動物的標本收集方法
七、實驗動物的處死方法
第四節 常見骨傷科疾病動物模型制備
一、急性軟組織挫傷動物模型
二、長骨干骨折動物模型
三、頸椎病動物模型
四、腰椎間盤突出癥動物模型
五、肩關節周圍炎動物模型
六、膝骨關節病動物模型
七、類風濕關節炎動物模型
八、股骨頭缺血性壞死模型
九、周圍神經損傷動物模型
十、骨質疏松癥動物模型
十一、慢性化膿性骨髓炎動物模型
十二、骨傷常用基因工程動物模型
第五章 骨傷組織學技術與方法
第一節 一般骨組織技術
一、骨組織制片的方法
二、骨組織染色的方法
第二節 電鏡技術
一、透射電子顯微鏡
二、掃描電子顯微鏡
三、其他顯微鏡技術
第三節 一般組織化學技術
一、骨組織切片的制備
二、骨組織化學顯色方法
第四節 免疫組織化學技術
一、實驗原理
二、非特異性著色對策與判斷
第五節 原位組織學技術
第六節 骨組織形態計量學技術
一、骨組織形態計量學的主要計算參數及含義
二、全自動圖像分析
三、骨組織形態計量學的優越性
四、骨組織形態計量學的局限性
第六章 骨傷細胞生物學技術與方法
第一節 成骨細胞的分離、培養、鑒定和檢測
一、成骨細胞的分離和培養
二、成骨細胞的鑒定
三、成骨細胞功能測定
第二節 破骨細胞的分離、培養、鑒定和檢測
一、破骨細胞的形態及功能
二、破骨細胞的分離與培養
三、破骨細胞的鑒定和檢測
第三節 軟骨細胞的分離、培養、鑒定和檢測
一、軟骨細胞分離技術
二、關節軟骨細胞培養技術
三、細胞因子
四、關節軟骨細胞鑒定技術
第四節 髓核細胞的分離、培養、鑒定和檢測
一、髓核細胞分離、培養
二、小鼠髓核細胞的檢測與鑒定
三、髓核細胞的分泌
第五節 神經細胞的分離、培養、鑒定和檢測
一、神經細胞的分離和培養
二、神經細胞的鑒定和檢測
第六節 骨髓間充質干細胞的分離、培養、鑒定及檢測
一、骨髓間充質干細胞的分離培養
二、骨髓間充質干細胞的鑒定及檢測
三、骨髓間充質干細胞多向分化能力
第七章 骨傷分子生物學技術與方法
第一節 聚合酶鏈反應技術
一、PCR的基本原理
二、反轉錄PCR的基本原理
第二節 基因重組技術
第三節 核酸雜交技術
一、DNA探針的制備
二、Southem印跡法
三、Northem印跡法
第四節 蛋白質檢測方法
第五節 分子生物學對骨傷科相關疾病的影響
一、中醫藥治療骨關節炎分子生物學研究進展
二、中醫藥治療頸椎病的分子機制研究
第八章 影像學與電生理技術在實驗骨傷科學中的應用
第一節 X線技術
一、X線成像的原理
二、X線技術的發展
三、數字X線技術的分類
第二節 小動物成像
一、小動物成像的背景與原理
二、小動物成像技術的發展
三、小動物成像技術分類
第三節 顯微CT
第四節 核素成像
一、放射性核素骨顯像的原理
二、影響骨顯像劑在骨中聚集的因素
三、骨顯像劑
四、檢查方法及設備
五、顯像的方式和種類分析
六、放射性核素分析在骨傷科基礎科學研究中的運用
第五節 電生理技術
一、生物電測量技術的原理
二、電生理測量技術
第九章 臨床流行病學在骨傷科學中的應用
第一節 臨床流行病學發展概況
一、臨床流行病學的特點
二、臨床流行病學的任務
三、臨床流行病學研究的方法學
四、臨床流行病學對臨床醫學的作用和價值
五、臨床流行病學方法在中醫藥臨床研究中的作用
第二節 臨床科研設計的基本原則與方法
一、隨機化
二、對照
三、盲法
第三節 循證醫學
一、循證醫學方法
二、系統評價概述
主要參考文獻

七、類風濕關節炎動物模型
1.原理用Ⅱ型膠原加不完全弗氏佐劑皮內注射造成大鼠的自身免疫反應，其滑膜、關節軟骨的病理變化類似類風濕關節炎的表現。
2.方法選用Wistar大鼠，體重90g左右。取一定量的Ⅱ型膠原粗取物，用0.5M乙酸溶解，使之終濃度為15mg／ml，加入等量的不完全弗氏佐劑，充分乳化。取乳化液0.125ml，于大白鼠尾部、踝部各處皮下注射，每只動物注射1次。
3.結果動物毛發失去光澤，懶動，體重減輕，踝關節明顯紅腫，觸及時可見逃避反射。第7天的組織等觀察可見滑膜組織充血水腫，纖維素滲出等改變；第15天除上述改變外，滑膜細胞增生肥大，毛細血管增生；第30天關節軟骨破壞；第45天出現骨細胞變性、壞死。
八、股骨頭缺血性壞死模型
（一）外傷性股骨頭缺血性壞死模型
1.原理用手術的方法將動物股骨基底部截骨，使供養股骨頭的血運中斷而致股骨頭缺血性壞死。
2.方法采用體重3kg左右的成年家兔。全麻后，以兔髖關節外側入路，暴露一側髖關節，切開關節囊，切斷圓韌帶，使髖關節脫位。從股骨頭內上方沿頸部向大轉子下方穿入直徑1mm的克氏鋼針1枚，然后在股骨頸基底部截骨，將股骨頭沿著鋼針上移位，使骨折端完全分離3～5分鐘，隨后將鋼針向遠端加壓，使鋼針不露出股骨頭軟骨面外表，而骨折端復位滿意。最后將股骨頭還納于髖臼內。
3.結果術后8周的x線片上見到密度增加，髖臼和股骨近端彌漫性骨質疏松，股骨頸骨折線清晰。8～20周大多數動物股骨頭密度進一步增加，并出現散在囊性變，骨折線模糊不清，髖臼上下緣、股骨頸、大小轉子和股骨近段骨折端均有骨質增生，但無股骨頭塌陷現象。
（二）激素性股骨頭缺血性壞死的模型
1.原理類固醇類激素使用后能引起骨質疏松和股骨頭壞死。
2.方法采用成年家兔，體重3k9左右。每周注射長效潑尼松4.2mg／kg，連續8周。12.25mg／kg的劑量雖能加快造模速度，但動物死亡太多。
3.結果動物消瘦，少食，便稀。術后2周的股骨頭切片即可見到毛細血管增多、充血、骨細胞壞死、脂肪細胞膨大的改變，8周時骨細胞大量壞死，留下空的骨陷窩，骨小梁變細如飄帶狀。
九、周圍神經損傷動物模型
1.原理用鉗夾切割或牽拉的方法造成動物坐骨神經的直接損傷，供不同目的的實驗觀察周圍神經生長情況。