生物技術製藥實驗指南（簡體書）

本書為與普通高等院校“生物技術製藥”課程配套的實驗課教材，重點在於結合理論課堂知識通過系列實驗夯實學生生物技術實驗基礎，提高生物技術綜合實驗的實踐操作能力，對生物技術製藥課程能夠做到理論與實際結合，系統掌握相關知識並能靈活運用。本書包含五章內容，前四章分別以基因工程、細胞工程、抗體工程和發酵工程為主線，對其涉及的基因工程上下游技術、細胞培養技術、單克隆和多克隆抗體製備技術以及微生物培養技術的基礎實驗做了重點介紹；第五章為綜合設計實驗，內容包括系統運用大腸桿菌和畢赤酵母分別進行蛋白類藥物製備，以及人血紅蛋白單克隆抗體的製備和工業微生物的篩選與鑒定。本書有較強的教學針對性與應用性，可作為高等學校製藥工程專業本科實驗教材，也可供生物技術製藥領域的研究人員參考。

董彬，男，1989年出生，濱州學院生物製藥本科專業必修課程主講教師。天津科技大學博士，研究方向為生物技術及應用，現工作於濱州學院生物與環境工程學院。

生物技術製藥實驗室管理規則...-6-第一章基因工程與製藥技術...-8-實驗一質粒DNA提取...-8-實驗二瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA..-11-實驗三PCR法擴增DNA及鑒定...-14-實驗四DNA的重組拼接技術...-17-實驗五化學轉化法大腸桿菌感受態細胞的製備...-20-實驗六電轉化法大腸桿菌感受態細胞的製備...-22-實驗七重組質粒的誘導表達...-24-實驗八重組蛋白的純化...-26-實驗九蛋白質的定量分析...-28-實驗十SDS-PAGE電泳實驗...-31-實驗十一Westernblotting實驗...-33-實驗十二酶聯免疫吸附實驗...-36-第二章細胞工程與製藥技術...-39-實驗一植物細胞培養基的製備...-39-實驗二植物愈傷組織的培養...-43-實驗三植物原生質體的製備...-45-實驗四植物原生質體的分離與融合...-47-實驗五動物細胞原代培養...-50-實驗六動物細胞的傳代培養...-52-實驗七動物細胞的凍存與復蘇...-54-第三章抗體工程與製藥技術...-56-

實驗一小鼠脾細胞的製備...-56-實驗二細胞融合與培養...-58-實驗三雜交瘤細胞篩選...-60-實驗四單克隆抗體的純化...-63-實驗五多克隆抗體的製備與純化...-65-第四章發酵工程與生物技術製藥...-68-實驗一微生物基礎培養基的配製...-68-實驗二無菌操作及微生物接種技術...-72-實驗三微生物數量的測定...-76-實驗四比濁法測定微生物的生長曲線...-79-實驗五麯黴固體發酵生產纖維素酶及酶解底物反應...-81-第五章綜合設計實驗...-83-實驗一人血清白蛋白在大腸桿菌中的重組表達及製備...-83-實驗二白細胞介素II在畢赤酵母中的重組表達及製備...-88-實驗三人血紅蛋白單克隆抗體的製備...-92-實驗四高產聚蘋果酸菌株篩選分離...-96-附錄一生物技術製藥實驗常用試劑的配製方法-100-附錄二生物技術製藥常用培養基的配製...-104-