Badanie mechanizmów cytotoksycznych w ludzkich komórkach NK

Kom鏎ki NK (natural killer) są częścią wrodzonego ukladu odpornościowego. Tworzą one synapsę immunologiczną (IS) z zainfekowanymi lub nowotworowymi kom鏎kami docelowymi i zabijają je za pomocą receptor闚 śmierci (ligand Fas CD95 i receptor Fas CD178) lub poprzez uwalnianie perforiny i granzymu z granulek litycznych. Wiązanie Fas-FasL indukuje apoptozę. Uwalnianie perforiny może wywolac bezpośrednią lizę kom鏎ek docelowych (nekrozę) lub doprowadzic do przeniknięcia granzym闚 do kom鏎ki docelowej, co indukuje apoptozę. Oba rodzaje śmierci kom鏎ek docelowych zależne od NK zostaly opisane w literaturze, jednak analizy populacyjne zostaly przeprowadzone wylącznie za pomocą test闚 końcowych. Dynamiczna regulacja zależnej od NK apoptozy i nekrozy kom鏎ek docelowych na poziomie pojedynczych kom鏎ek nie zostala jeszcze zbadana. Aby zbadac dynamiczne procesy zachodzące w pojedynczych kom鏎kach, kom鏎ki docelowe, kt鏎e mogą zostac zabite przez ludzkie kom鏎ki NK, zostaly stabilnie transfekowane czujnikiem śmierci kom鏎kowej. Test ten pozwala na klasyfikację apoptozy i nekrozy pojedynczych kom鏎ek na podstawie r?#380;nych wzor闚 fluorescencji czujnika opartego na FRET.