Purificazione e caratterizzazione della beta-amilasi

La β-amilasi ?stata purificata e caratterizzata dal Bacillus subtilis isolato dai semi fermentati di Parkia biglobosa. La purificazione ?stata ottenuta utilizzando una colonna DEAE a scambio ionico e cromatografia a gel filtrazione (Sephadex G-200). Sono stati studiati gli effetti della temperatura, del pH e del tempo di produzione sulla produzione di β-amilasi, mentre sono state studiate le caratteristiche fisico-chimiche dell'enzima purificato. La produzione ottimale di β-amilasi ?stata ottenuta a una temperatura, un pH e un tempo rispettivamente di 37 C, 7,0 e 24 ore. I risultati hanno mostrato che la β-amilasi purificata aveva un'attivit?enzimatica maggiore rispetto ai campioni grezzi provenienti dal Bacillus subtilis, in cui l'attivit?dell'enzima grezzo era di 3,21 mM/min/ml, mentre l'enzima purificato aveva un'attivit?migliorata di 21,46 mM/min/ml. I valori ottimali di temperatura e pH dell'amilasi purificata sono risultati rispettivamente 50 C e pH 5,0. La stabilit?del pH dell'enzima variava da pH 4,0 a 9,0. A pH 5,0 e 7,0, dopo 5 ore di incubazione, manteneva rispettivamente il 70% e il 60% della sua attivit? La stabilit?della temperatura variava tra 40 C e 70 C, ma era pi?stabile a 50 C, conservando il 64% della sua attivit?dopo 1 ora di incubazione. L'enzima ha mostrato la massima attivit?su amido solubile e saccarosio.