Purificação e caracterização da beta-amilase

A β-amilase foi purificada e caracterizada a partir de Bacillus subtilis isolado de sementes fermentadas de Parkia biglobosa. A purifica誽o foi realizada utilizando coluna de troca i鏮ica DEAE e cromatografia de filtra誽o em gel (Sephadex G-200). Foram investigados os efeitos da temperatura, pH e tempo de produ誽o na produ誽o de β-amilase, enquanto as caracter疄ticas f疄ico-qu璥icas da enzima purificada foram investigadas. A produ誽o ideal de β-amilase foi obtida a uma temperatura, pH e tempo de 37 C, 7,0 e 24 h, respetivamente. Os resultados mostraram que a β-amilase purificada tinha mais atividade enzim嫢ica do que as amostras brutas de Bacillus subtilis, em que a atividade da enzima bruta era de 3,21 mM/min/ml, enquanto a enzima purificada tinha uma atividade melhorada de 21,46 mM/min/ml. Os valores 鏒imos de temperatura e pH da amilase purificada foram 50 C e pH 5,0, respetivamente. A estabilidade do pH da enzima variou entre pH 4,0 e 9,0. Em pH 5,0 e 7,0, ela manteve 70% e 60% da sua atividade, respetivamente, ap鏀 5 h de incuba誽o. A estabilidade da temperatura variou entre 40 C e 70 C, mas foi mais est嫛el a 50 C, mantendo 64% da sua atividade ap鏀 1 hora de incuba誽o. A enzima exibiu atividade m嫞ima em amido solel e sacarose.