聚合酶鏈式反應(PCR)快速檢測腐爛蘋果中的擴展青黴（簡體書）

內容包括：蘋果汁中的擴展青霉污染及PCR技術應用、擴展青霉基因組DNA的提取、腐爛蘋果中的真菌分離與鑒定、基于氯化芐法提取DNA的PCR檢測擴展青霉方法優化、PCR擴增產物的克隆測序、擴展青霉3.3703基因組DNA快速提取、PCR特異性擴增擴展青霉3.3703和擴展青霉3.5425、擴展青霉3.5425實時 PCR快速檢測條件優化、PCR快速檢測不同來源擴展青霉菌的條件優化。

何鴻舉，愛爾蘭都柏林大學（University College Dublin）博士，河南科技學院特聘教授、碩士生導師、食品無損檢測與分析團隊帶頭人，主要從事食質量量分析與快速檢測研究。近五年主持或參與科研項目13項，發表論文30余篇，以第一作者發表高水平SCI論文10篇，主編教材2部，並擔任食品科技領域20余種SCI期刊審稿人。

第一章 蘋果汁中的擴展青霉污染及PCR技術應用
第一節 我國蘋果及其加工生產狀況
一、蘋果特性及其營養價值
二、我國蘋果的生產現狀與發展前景
三、我國蘋果加工面臨的競爭與挑戰
第二節 棒曲霉毒素
一、理化性質與危害
二、分析方法
第三節 擴展青霉
一、概述
二、檢測方法
第四節 PCR技術應用概述
一、PCR技術原理
二、PCR檢測技術的發展
三、PCR技術在微生物檢測領域的應用
第五節 真菌DNA提取
第六節 克隆測序
一、感受態細胞的制備
二、藍白篩選的原理
三、電泳的原理
第七節 本研究的目的意義、內容及技術路線
一、研究目的及意義
二、研究內容
三、研究的技術路線
第二章 擴展青霉基因組DNA的提取
第一節 材料與方法
一、試驗菌株與培養基
二、主要試劑
三、主要儀器
四、菌體培養與收集
五、DNA提取方法
六、DNA檢測方法
七、PCR擴增方法
八、凝膠電泳檢測方法
第二節 結果與分析
一、培養方式的選擇
二、五種提取擴展青霉基因組DNA方法的比較
三、五種提取方法所提DNA結果的比較
四、電泳檢測所提DNA的結果
五、PCR擴增結果
第三節 結論與討論
第三章 腐爛蘋果中的真菌分離與鑒定
第一節 材料與方法
一、材料與試劑
二、儀器與設備
三、方法與步驟
第二節 結果與分析
一、棒曲霉素產生菌的主要種類
二、不同產地腐爛蘋果中棒曲霉素產生菌的差異
第三節 結論與討論
第四章 基于氯化芐法提取DNA的PCR檢測擴展青霉方法優化
第一節 材料與儀器
一、主要原材料
二、主要試劑
三、主要儀器設備
第二節 方法與步驟
一、引物選擇
二、退火溫度的優化
三、引物濃度的選擇
四、模板濃度的選擇
第三節 結果與分析
一、引物的選擇
二、退火溫度
三、引物濃度優化結果
四、模板濃度
五、特異性
六、靈敏性檢測結果
第四節 結論與討論
第五章 PCR擴增產物的克隆測序
第一節 材料與儀器
一、主要試劑
二、主要儀器設備
第二節 方法與步驟
一、感受態細胞的制備
二、PCR擴增產物回收純化
三、克隆質粒的構建
四、轉化感受態細胞
五、質粒DNA制備
六、質粒的雙酶切鑒定
七、測序
第三節 結果與分析
一、轉化結果
二、陽性克隆鑒定結果
三、測序與Blast結果
第四節 結論與討論
第六章 擴展青霉3.3703基因組DNA快速提取
第一節 材料與方法
一、材料與試劑
二、儀器與設備
三、方法與步驟
四、提取DNA的純度及濃度檢測
五、PCR擴增
六、凝膠電泳檢測
第二節 結果與分析
一、四種方法提取DNA純度及濃度檢測結果
二、四種方法提取總DNA樣品檢測結果
三、PCR擴增檢測結果
第三節 結論與討論
第七章 PCR特異性擴增擴展青霉3.3703和擴展青霉3.5425
第一節 材料與方法
一、材料與試劑
二、儀器與設備
三、方法與步驟
第二節 結果與分析
一、PCR擴增引物篩選結果
二、PCR引物特異性試驗結果
三、PCR敏感性試驗結果
第三節 結論與討論
第八章 擴展青霉3.5425實時PCR快速檢測條件優化
第一節 材料與方法
一、材料與試劑
二、儀器與設備
三、方法與步驟
第二節 結果與分析
一、退火溫度對擴展青霉3.5425實時PCR結果的影響
二、引物濃度對擴展青霉3.5425實時PCR檢測的影響
三、實時 PCR靈敏度檢驗
第三節 結論與討論
第九章 PCR快速檢測不同來源擴展青霉菌的條件優化
第一節 材料與方法
一、材料與試劑
二、主要儀器與設備
三、試驗方法與步驟
四、試驗真菌培養基
第二節 結果與分析
一、PCR退火溫度優化結果
二、最適引物濃度的篩選
三、最適模板濃度的篩選
四、最適底物濃度的選擇
五、優化參數條件下的PCR檢測
六、人工感染六品的PCR檢測
第三節 結論與討論
參考文獻