細胞工程（簡體書）

《細胞工程》是全國高職高專教育“十一五”規劃教材。《細胞工程》以細胞工程基本概念、基本理論和關鍵技術及其實際應用為主線，從高職高專教學的培養目標出發，本著“理論夠用，突出技能”的原則，以基礎知識為主體，強化對學生的實踐技能和創業精神的培養，全面提高學生的綜合素質。《細胞工程》由三部分組成：總論重點介紹細胞工程的概念、發展簡史及其在現代生物技術中的地位與應用；細胞工程的基礎；細胞工程的基本設備和基本技術。理論部分分別介紹植物細胞工程和動物細胞工程的相關概念、基本原理、關鍵技術；實訓部分介紹當前細胞工程最實用和前沿技術及規範標準，使學生能真正掌握，進入工作崗位能直接上手。《細胞工程》適于作為應用性、技能型人才培養各類教育生物技術、生物製藥、食品等專業教學用書，亦適合相關領域工作人員參考。

總論
第一章 緒論
第一節 細胞工程的基本概念
第二節 細胞工程的主要技術
一、細胞與組織培養技術
二、細胞融合技術
三、細胞拆合技術
四、染色體工程
五、胚胎工程
六、細胞遺傳工程
七、干細胞與組織工程
第三節 細胞工程的發展歷史
一、植物細胞工程的發展簡史
二、動物細胞工程的發展簡史
第四節 細胞工程的應用
一、植物脫毒和離體快繁
二、新型動植物品種的培育
三、珍惜動植物種質資源的保存和保護
四、利用動植物細胞培養生產有用物質
五、通過體外受精和胚胎移植技術產生試管動物(嬰兒)
六、獲得克隆動物
七、干細胞的研究和應用
第五節 細胞工程與其他現代生物技術的關係

第二章 細胞工程基礎
第一節 細胞生物學基礎
一、細胞的發現
二、細晌的分類
三、細胞器的結構與功能
四、染色質和染色體
五、細胞分裂與增殖
六、細胞周期
七、細胞分化與細胞全能性
八、細胞衰老、凋亡與癌變
第二節 分子生物學基礎
一、核酸
二、蛋白質
三、遺傳信息從DNA復制到蛋白質表達
四、基因工程技術

第三章 細胞工程實驗室設置與基本技術
第一節 實驗室設置
一、洗滌室
二、滅菌室
三、配制室
四、無菌操作室(接種室)
五、培養室
六、鑑定室
七、馴化移植室
第二節 實驗室主要儀器設備
一、常規設備
二、滅菌設備
三、培養設備
四、培養容器與用具
五、無菌操作設備
第三節 細胞工程的基本操作技術
一、洗滌技術
二、滅菌技術
三、無菌操作技術
四、外植體的選擇與處理技術(以植物為例)
第四節 培養基的成分、配制與選擇
一、培養基的成分及其作用
二、培養基的配方及培養基的選擇
三、培養基的配制方法
第五節 培養條件的選擇
一、光照
二、溫度
三、濕度
四、pH
五、滲透壓
六、氣體

第一篇 植物細胞工程
第四章 植物組織器官培養技術
第一節 植物組織培養的基本原理
一、植物組織培養的相關定義
二、植物組織培養的基本原理
第二節 植物組織培養的基本步驟
一、無菌外植體的獲得
二、初代培養物的建立
三、形態發生和植株再生
四、培養產物的觀察記載
第三節 植物脫毒與快速繁殖技術
一、植物快速繁殖及脫毒的基本概念
二、植物脫毒和快速繁殖的意義
三、植物脫毒的原理和技術
四、離體繁殖技術
第四節 花藥及花粉培養
一、基本概念與意義
二、花藥和花粉培養技術
第五節 植物胚胎培養
一、幼胚培養及其應用
二、胚珠與子房培養及其應用
三、胚乳培養及其應用
第六節 人工種子
一、人工種子的概念
二、繁殖體的類型及其生產
三、人工種子包被
四、人工種子的發展和應用前景

第五章 植物細胞培養技術
第一節 植物單細胞的分離
一、由植物器官分離單細胞
二、由愈傷組織分離單細胞
第二節 單細胞培養技術
一、植物單細胞培養的意義
二、單細胞培養的方法
三、影響單細胞培養的因素
四、細胞培養注意事項
第三節 植物細胞懸浮培養
一、細胞懸浮培養原理
二、培養方法
三、懸浮系的建立與繼代培養
四、懸浮培養細胞的同步化
五、細胞增殖的測定
六、培養細胞活力的檢查
第四節 植物細胞的規模培養
一、概述
二、植物細胞規模化培養體系的建立
三、生物反應器類型及特點
四、植物細胞規模化培養中的有關工程技術問題
第五節 植物細胞培養的應用
一、篩選突變體
二、生產植物次生代謝產物

第六章 植物原生質體培養和體細胞雜交
第一節 原生質體的分離和培養
一、原生質體的分離
二、原生質體的純化與活力測定
三、原生質體的培養
第二節 體細胞雜交
一、植物體細胞雜交的概念
二、體細胞雜交技術

第七章 植物基因轉化受體系統
第一節 植物基因轉化受體系統自類型及其特性
一、植物基因轉化受體系統應具備的條件
二、幾種植物基因轉化受體系統
第二節 植物基因轉化受體系統建立的程序
一、高頻再生系統的建立
二、抗生素敏感性試驗
三、農桿菌的敏感性試驗及菌種的選擇
四、影響受體系統轉化效率的因素
第三節 植物基因轉化受體系統建立中常遇的問題
一、試管苗的玻璃化現象
二、培養物的褐變
三、白化苗的產生
四、試管苗的移栽成活率

第八章 植物種質資源的保存
第一節 植物種質資源保存類型
第二節 試管保存
一、常溫下試管保存
二、常溫抑制生長保存
三、中低溫調控生長保存
四、常溫抑制生長保存與中低溫調控生長保存相結合
第三節 超低溫保存
一、超低溫保存的概念
二、超低溫保存的基本原理
三、超低溫保存技術

實訓上
實訓項目一 細胞工程基礎實驗技術
實訓項目二 無菌操作及愈傷組織誘導技術
實訓項目三 器官發生與植株再生調控培養、愈傷組織增殖培養
實訓項目四 細胞懸浮培養及種細胞篩選技術
實訓項目五 細胞規模化培養
實訓項目六 原生質體分離與體細胞雜交
實訓項目七 煙草遺傳轉化實驗
實訓項目八 小麥成熟胚培養
實訓項目九 月季組織培養
實訓項目十 馬鈴薯試管微薯的誘導
附 常用的培養基配方
(濃度單位：mg/L)

第二篇 動物細胞工程
第九章 動物細胞培養的基本知識與技術
第一節 動物細胞體外培養的設備器具與體外培養用液
一、體外細胞培養所用器具的無菌處理
二、體外培養用液
三、培養基
四、細胞培養基種類
第二節 動物細胞的體外培養生長特徵
一、貼附生長
二、生長的接觸抑制及密度依賴性
第三節 細胞培養的基本方法與過程
一、原代培養基本原理
二、原代培養步驟
三、傳代培養
四、細胞的純化和克隆
五、細胞的凍存與復蘇
六、細胞計數及活力測定
七、細胞的分裂指數測定
八、細胞周期的測定
九、培養物的污染及防止
第四節 幾種常見動物細胞培養
一、上皮類細胞培養
二、結締組織類細胞培養
三、肌組織類細胞培養
四、人胚腎細胞培養
五、神經組織細胞培養
六、神經膠質細胞培養
七、腫瘤細胞培養

第十章 動物細胞大規模培養技術
第一節 動物細胞的增殖過程
第二節 大規模培養技術簡介
第三節 大規模培養常用方法
一、懸浮培養
二、貼壁培養
三、固定化培養
第四節 大規模培養技術的操作方式
一、批式操作
二、加式操作
三、連續式操作
第五節 動物細胞大規模培養用生物反應器簡介
一、氣升式細胞培養生物反應器
二、機械攪拌式生物反應器
三、填充床反應器系統
四、動物細胞培養反應器的設計策略
第六節 微載體培養技術
一、微載體種類
二、微載體表面的細胞生長

第十一章 動物細胞培養的應用技術
第一節 動物細胞培養在單克隆抗體制備中的應用
一、雜交瘤技術的基本原理和過程
二、雜交瘤技術制備單克隆抗體的基本過程及方法
三、典型制備單克隆抗體具體步驟
四、單克隆抗體的應用
第二節 外源基因在動物細胞中的表達
一、外源基因在動物細胞中表達的基本原理與基本技術
二、外源基因在動物細胞中表達的具體過程
三、轉染細胞鑑定
第三節 動物細胞培養法生產疫苗
一、疫苗的分類
二、疫苗的生產技術
三、生產病毒和制備病毒疫苗的常用方法
四、疫苗製品純化技術
第四節 動物細胞培養在組織工程中的應用
一、組織工程研究內容
二、組織工程實現方式
三、動物細胞培養在組織工程研究的重要性
四、組織工程研究進展

第十二章 動物干細胞技術簡介
第一節 干細胞簡介
一、干細胞的定義
二、干細胞的分類
第二節 胚胎干細胞的特性
一、形態學特徵
二、特異性標志分子的表達
三、細胞周期的特徵
四、端粒酶
第三節 胚胎干細胞的分離培養
一、分化抑制物的選擇和培養基設計
二、早期胚胎的選擇及培養
三、分離及培養過程
四、ES細胞的堅定
五、Es細胞的冷凍保存
六、Es細胞系的建立及保存
第四節 胚胎干細胞的定向分化
一、胚胎性干細胞定向分化的常用策略
二、分化細胞的鑑定與純化

實訓下
實訓項目一 細胞分離培養前準備工作
實訓項目二 血管平滑肌細胞原代分離培養
實訓項目三 血管平滑肌細胞傳代培養
實訓項目四 血管平滑肌細胞鑑定、凍存及復蘇