生物化學與分子生物學實驗技術（簡體書）

本書共分六章。第一章介紹生物化學實驗基本技術；第二章和第三章主要介紹高分子化合物--蛋白質及核酸的分離和提取及結構和性質的鑑定；第四章介紹酶的催化作用及酶反應動力學分析；第五章介紹物質代謝的分析方法；第六章介紹分子生物學基本實驗技術，共設實驗項目27個。本書可供醫學類高等院校本科生及研究生使用，也可供其他相關學科的研究工作者參考。由于實驗條件有限，故此生化與分子生物學實驗技術講義所含內容不可能全面，加上我們水平有限，錯漏之處在所難免，熱切歡迎使用本書的教師和同學給予批評指正，以利我們進一步修改。

第一部分 生物化學與分子生物學常用分析技術
第一章 分光光度法
第一節 基本原理
第二節 分光光度法的應用
第三節 分光光度計的結構原理
第四節 常用的國產分光光度計的使用
第二章 電泳技術
第一節 影響泳動率的因素
第二節 電泳技術的種類
第三節 染色方法
第三章 層析技術
第一節 吸附層析
第二節 分配層析
第三節 離子交換層析
第四節 凝膠過濾
第五節 親和層析
第四章 離心技術
第一節 基本原理
第二節 離心機的種類與用途
第三節 離心分離方法的選擇
第四節離心條件的確定
第五章 蛋白質制備與分析技術
第一節 概述
第二節 選擇材料及預處理
第三節 細胞的破碎及細胞器的分離
第四節 蛋白質的提取、分離與純化
第五節 蛋白質的定量及純度分析
第六節 蛋白質相對分子量測定
第七節 蛋白質的濃縮、干燥及儲存
第六章 基因工程及基因表達分析技術
第一節 基因工程基本技術
第二節 聚合酶鏈反應
第三節 核酸分子雜交
第四節 DNA測序技術

第二部分 生物化學與分子生物學實驗
第七章 蛋白質分離純化與理化性質分析
實驗一 蛋白質的定量測定
實驗二 血清蛋白質的層析分離
實驗三 血清蛋白質的電泳分離
實驗四 蛋白質理化性質分析
實驗五 固定化蛋白質的免疫生化鑑定(Western印跡)
第八章 酶作用及酶反應動力學
實驗六 酶的特異性及溫度、pH對酶活性的影響
實驗七 堿性磷酸酶的提純、比活性的測定
實驗八 堿性磷酸酶的Km測定
實驗九 磷酸鹽對堿性磷酸酶的抑製作用
實驗十 乳酸脫氫酶同工酶分析
第九章 物質代謝
實驗十一 胰島素和腎上腺素對血糖濃度的影響
實驗十二 肝糖原的提取和定量
實驗十三 血漿高密度脂蛋白一膽固醇含量的測定
實驗十四 磷脂的提取及其薄板層析
實驗十五 血清丙氨酸轉氨酶活性的測定(改良賴氏法)
實驗十六 紙層析法鑑定轉氨酶的轉氨基作用
第十章 外源基因的制備
實驗十七 真核生物基因組DNA的制備(苯酚法)
實驗十八 人外周血白細胞DNA的制備
實驗十九 DNA與RNA含量測定
實驗二十 瓊脂糖凝膠電泳分離DNA
實驗二十一 聚合酶鏈反應(PCR)技術體外擴增IDNA
第十一章 載體選擇與限制性內切酶酶切
實驗二十二 質粒DNA的制備
實驗二十三 限制性內切酶酶切
第十二章 外源基因與載體連接
實驗二十四 目的DNA片段的分離和純化
實驗二十五 DNA片段與載體的連接
第十三章 連接產物轉化
實驗二十六 感受態細菌的制備(化學法)
實驗二十七 質粒DNA的轉化
第十四章 重組質粒篩選
實驗二十八 重組質粒的篩選
實驗二十九 Southern blot(印跡)
第十五章 基因表達分析
實驗三十 外源基因的原核表達
實驗三十一 外源基因在真核生物中的表達
實驗三十二 動物組織總RNA的提取
實驗三十三 反轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)
附錄
附錄一 硫酸銨飽和度計算表
附錄二 常用緩沖溶液的配制
附錄三 常用蛋白質相對分子量及等電點
附錄四 色譜法常用數據
附錄五 離心轉速和離心力的換算
附錄六 實驗數據和數據處理