微生物與海洋微生物學實驗（簡體書）

《海洋生命科學實驗教材:微生物與海洋微生物學實驗》既可作為生命科學本科生的教學用書，又可作為與生命科學相關的藥學、生物工程、水產養殖、食品工程、環境工程等學科本科生的教學用書，也可作為相關專業研究生和研究人員的參考書。

實驗守則
第一部分基礎性實驗
實驗一顯微鏡油浸物鏡的使用
實驗二細菌的簡單染色和革蘭氏染色
實驗三細菌的芽孢染色
實驗四細菌的鞭毛染色及運動性觀察
實驗五細菌的莢膜染色
實驗六放線菌的形態觀察
實驗七霉菌標本片的制備與觀察
實驗八酵母菌的形態觀察及細胞死活的鑒別，微生物細胞大小的測定
實驗九培養基的原理及配制
實驗十滅菌和消毒
實驗十一土壤細菌的分離與計數
實驗十二微生物接種技術
實驗十三微生物菌落的形態觀察
實驗十四微生物的培養特征
實驗十五菌種保藏
實驗十六微生物細胞的顯微鏡直接計數法
實驗十七稀釋平板計數法
實驗十八光電比濁計數法
實驗十九大腸桿菌生長曲線的測定
實驗二十紫外線殺菌實驗
實驗二十一化學試劑對微生物的作用
實驗二十二氧對微生物生長的影響
實驗二十三溫度對微生物的影響
實驗二十四微生物耐鹽性的測定
實驗二十五氫離子濃度對微生物生長的影響
實驗二十六生物因素對微生物的影響
實驗二十七抗生素效價的測定
實驗二十八用最低抑制濃度法（MIC）測制菌效力
實驗二十九用生長譜法測定微生物的營養要求
實驗三十油脂水解實驗
實驗三十一淀粉水解實驗
實驗三十二明膠分解實驗
實驗三十三糖發酵實驗
實驗三十四吲哚實驗
實驗三十五甲基紅（M.R.）實驗
實驗三十六 乙酰甲基甲醇（V.P.）實驗
實驗三十七檸檬酸鹽實驗
實驗三十八產硫化氫實驗
實驗三十九硝酸鹽還原實驗
實驗四十過氧化氫酶實驗
實驗四十一免疫熒光抗體染色技術
實驗四十二吖啶橙熒光顯微鏡直接計數
實驗四十三海洋細菌的活菌直接鏡檢計數
第二部分綜合性實驗
實驗四十四微生物的誘發突變
實驗四十五細菌質粒DNA的小量制備
實驗四十六質粒DNA的轉化
實驗四十七從自然環境中分離和純化噬菌體
實驗四十八噬菌體的提取及效價測定
實驗四十九水中細菌總數的測定
實驗五十多管發酵法測定水中大腸菌群
實驗五十一濾膜法測定水中大腸菌群
第三部分研究性實驗
實驗五十二用選擇培養基分離土壤中的固氮菌
實驗五十三根霉的分離和形態觀察
實驗五十四產幾丁質酶海洋細菌的分離及幾丁質酶的檢測
實驗五十五海洋細菌卵磷脂酶的檢測
實驗五十六海洋細菌酪蛋白酶的檢測
實驗五十七海洋細菌脲酶的檢測
實驗五十八海洋細菌β—半乳糖苷酶的檢測
實驗五十九褐藻酸降解菌的分離
實驗六十海洋發光細菌的分離培養
實驗六十一從水產動物分離霍亂弧菌及副溶血弧菌
實驗六十二海洋產瓊膠酶細菌的分離及降解瓊脂現象觀察
實驗六十三海洋拮抗細菌的分離篩選
實驗六十四海洋環境中酵母菌的分離培養
實驗六十五產嗜殺因子海洋酵母的分離及嗜殺能力測定
實驗六十六產淀粉酶海洋酵母菌的分離及篩選
實驗六十七產脂肪酶海洋酵母的分離與篩選
實驗六十八產丙酮酸海洋酵母的分離及篩選
實驗六十九產蛋白酶海洋酵母的分離和篩選
實驗七十海洋酵母菌的鑒定
實驗七十一香菇菌種的分離與栽培
實驗七十二微生物發酵技術
附錄一常用染色液和試劑的配制
附錄二實驗用培養基的配制
附錄三實驗室常用的消毒滅菌化學試劑
附錄四洗滌液的配制與使用
參考文獻

5）排氣閥：一般外鍋、內鍋各有一個，用于排除空氣。新型的滅菌器多在排氣閥外裝有汽液分離器（或稱疏水筏），內有由膨脹盒控制的活塞，利用空氣、冷凝水與蒸汽之間的溫差控制開關，在滅菌過程中，可不斷地自動排出空氣和冷凝水。
6）安全閥：利用可調彈簧控制活塞，超過額定壓力即自動放氣減壓。通常調在額定壓力之下，略高于使用壓力，安全閥只供超壓時安全報警之用，不可在保溫時用作自動減壓裝量。
7）熱源：除直接引入鍋爐蒸汽滅菌外，都具有加熱裝置。主要以電熱為主，即底部裝有調控電熱管，使用比較方便。手提式滅菌器也可用煤炭爐作為熱源。
（3）幾種常用高壓蒸汽滅菌鍋的使用方法。
1）立式滅菌鍋使用要點：
a.加水：由漏斗處加水，加水量應在標定水位線以上，可在水位玻管刻度處觀察。
b.裝鍋：將待滅菌物品裝入鍋內時，不要太緊太滿，應留有間隙，以利蒸汽流通。蓋好鍋蓋后，即可將螺旋柄旋緊。
c.加熱和排冷空氣：如果是電熱高壓蒸汽滅菌鍋，則合上電閘通電加熱。如屬非電熱裝置，可點燃煤氣爐或煤油噴燈加溫，同時打開排氣閥及下部排冷氣余水閥，繼續加熱到鍋中水沸騰。待排氣閥冒出大量蒸汽后，關閉蓋頂排氣活塞，使冷空氣由下部疏水閥排出。此時如有少量冷凝水排出是正常現象；待下部疏水閥有大量蒸汽冒出時，證明鍋中已充滿蒸汽，應繼續排汽，使鍋中及滅菌容器中的冷空氣完全排除干凈。一般不應少于5 min。
d.升壓保壓：排氣完畢后，關閉下部疏水筏，鍋內壓力即逐漸升高，注意升壓不要過猛。當壓力升高到0.1 MPa時，調節火力，使壓力保持穩定。壓力選擇應視具體滅菌物品而定，如草炭、土壤等則可在壓力升至0.14～0.15 MPa時定時保壓。
e.降壓與排汽：保壓時間（一般為30 min）結束后，即應停止加熱，使其自然冷卻。此時切勿急于打開排氣筏，因為壓力驟然降低，將導致培養基劇烈沸騰而沖掉或污染棉塞。待壓力降至0.025 MPa以下可打開排氣閥使余氣排出，同時打開下部疏水閥，排出鍋內冷凝水。
f.出鍋：排氣完畢后，即可扭松螺旋柄使鍋蓋松動。先將鍋蓋打開5～10cm，不必完全推開鍋蓋，目的是借鍋中余熱將棉塞及包裝紙烘干，烘烤30 min后，即可推開鍋蓋，取出已滅菌的物品。