生物工程專業實驗指導（簡體書）

《生物工程專業實驗指導》根據生物工程人才培養方案，將相關核心課程實驗內容編寫在一起，力求結構更緊湊，內容更合理，實用性更強，更好體現人才培養方案的意圖。內容主要包括生物工程實驗室管理和要求、生物化學實驗、微生物學實驗、分子生物學與基因工程實驗、發酵工程實驗、分離工程實驗共38個實驗。使專業學生一本在手，可以解決專業上很多問題。既培養學生分析問題和解決問題的能力，增強創新意識和創新能力；又大大提高了指導書的使用效率。本書同時也進行了專業特色融入實驗內容探索，使用者可以根據實際情況開展相關實驗。
本書可供高等學校生物工程、生物技術、食品工程、製藥工程等專業作為實驗指導書使用，也可供相關專業科研工作者作為參考書使用。

李加友，嘉興學院 生物與化學工程學院，副教授，1997年8月-2006年11月于金陵科技學院工作，任教師；2006年11月至今於嘉興學院生物與化學工程學院工作，曾任生物工程研究所所長，生物專業建設負責人，生物工程系主任。分別以副主編參編華中科技大學出版社出版的《生物工藝學》和浙江大學出版社出版的《發酵工程》。長期從事發酵工程方面的技術開發，在現代釀造技術和固態發酵方面開發的產品先後產業化，承擔了相關項目的工藝設計、生產選址、設備選型。先後承擔省部級科研課題5項，發表科研論文20多篇，申請國家專利60多項。

第一章生物工程實驗室管理和要求1

第一節實驗室管理總則1

第二節實驗室人員行為規範2

第三節實驗設備及耗材管理3

第四節實驗室藥品管理4

第五節微生物實驗室菌種管理制度5

第六節實驗室安全衛生管理6



第二章生物化學實驗8

實驗一氨基酸紙色譜8

實驗二蛋白質濃度測定(凱氏定氮法)11

實驗三福林-酚試劑法測定蛋白質的濃度15

實驗四酵母RNA的提取及組分鑒定18

實驗五醋酸纖維薄膜電泳法分離血清蛋白質20

實驗六酶促反應的影響因素23

實驗七堿法提取質粒DNA26

實驗八VC含量測定――2,6-二氯酚靛酚滴定法29

實驗九過氧化氫酶米氏常數(Km)的測定31



第三章微生物學實驗34

實驗十普通光學顯微鏡的使用及微生物形態觀察34

實驗十一細菌的革蘭氏染色38

實驗十二放線菌、黴菌的形態觀察41

實驗十三微生物大小測定和顯微計數43

實驗十四培養基的配製47

實驗十五微生物的平板分離技術50

實驗十六環境因素對微生物生長的影響53

實驗十七水中細菌總數的測定56

實驗十八酸奶的製作59

實驗十九空氣中微生物數量測定61

實驗二十微生物的誘發突變63

實驗二十一微生物的生理生化反應65



第四章分子生物學與基因工程實驗68

實驗二十二細菌基因組DNA的提取68

實驗二十三動物基因組DNA的提取70

實驗二十四植物基因組DNA的提取72

實驗二十五PCR擴增目的DNA74

實驗二十六DNA分子的酶切反應77

實驗二十七感受態細胞的製備79

實驗二十八重組子的構建81

實驗二十九質粒的轉化與鑒定83

實驗三十外源基因的表達檢測85



第五章發酵工程實驗87

實驗三十一菌種的製備與保藏87

實驗三十二酵母菌的發酵過程控制89

實驗三十三活性乾酵母的製備94

實驗三十四酵母固定化技術97

實驗三十五靈菌紅素的發酵製備98



第六章分離工程實驗100

實驗三十六靈菌紅素的分離純化與結構鑒定100

實驗三十七Ni-NTA金屬螯合法純化重組β-葡萄糖苷酶103

實驗三十八酵母蔗糖酶的提取與分離純化106



參考文獻110