分子生物檢驗技術(供醫學檢驗技術及相關專業使用)（簡體書）

《全國醫藥院校高職高專規劃教材（供醫學檢驗技術及相關專業使用）：分子生物檢驗技術》共12章。第1章為緒論。第2章和第3章著重介紹了基因組和基因組學，DNA、RNA、蛋白質等生物大分子的分離純化等理論。第4—9章描述了DNA重組技術、DNA測序技術、PCR技術、核酸分子雜交技術、生物芯片技術以及蛋白質分析技術。第10—12章分別介紹了感染性疾病的分子診斷、遺傳性疾病的分子診斷以及腫瘤的分子診斷技術及其臨床應用。．

岡野雅行，1933年生於日本東京，日本著名街道企業岡野工業公司總裁，岡野工業公司是世界知名的街道製造企業，岡野先生被時代週刊譽為世界第一製造人，盛讚他的手是最佳的感應器。小泉首相及索尼前總裁等政要財閥均前往觀摩討教。憑藉無人能模仿的高超技術，只有6名員工的岡野工業公司創造了年銷售額6億日元的驕人業績。其著有《僅憑學校的學習沒法混飯吃》、《把不可能變為可能的技術發想》、《錢會跟著來》、《世界第一手藝人的趣味工作術》等。．

《全國醫藥院校高職高專規劃教材:分子生物檢驗技術(供醫學檢驗技術及相關專業使用)》是由人民軍醫出版社出版。

第1章 緒論
第2章 基因組與基因組學
第3章 生物大分子的分離與純化
第4章 DNA重組技術
第5章 DNA測序技術
第6章 聚合酶鏈反應技術
第7章 核酸分子雜交技術
第8章 生物芯片技術
第9章 蛋白質分析技術
第10章 感染性疾病的分子診斷
第11章 遺傳性疾病的分子診斷
第12章 腫瘤的分子診斷
參考文獻．

斑點印跡雜交（dot blot hybridization）和狹縫印跡雜交（slot blot hybridization）的原理和操作過程相同。先將提取的核酸或濃縮標本直接滴于硝酸纖維素膜或尼龍膜等固相支持物上，核酸經變性處理后80℃烘烤2h，使其固定于膜上，標記探針直接和膜上固定的樣品核酸進行雜交，用放射自顯影或其他方法檢測雜交結果。整個過程不需要電泳和轉膜，所以這種方法操作簡便快速。兩法的區別在于印跡模具形狀的不同，分別為圓形或夾縫狀。一般來說，斑點印跡更為清晰，定量更為準確。
四、菌落雜交
菌落雜交（colony hybridization）是主要用于重組細菌克隆篩選的固相雜交技術。主要步驟包括：①將細菌菌落在一定培養基平板上進行培養；②硝酸纖維素薄膜平鋪至細菌平板上，使菌落黏附到薄膜上；③將薄膜放到經適當溶液飽和的吸水紙上，菌斑原位溶解，釋放出單鏈DNA；④烘干固定DNA，與放射性核素標記的單鏈探針雜交；⑤雜交后，洗脫未結合的探針，將薄膜暴露于X線膠片進行放射自顯影；⑥將自顯影膠片、薄膜、培養平板相對照，即可確定陽性菌落。
五、原位雜交
在不改變細胞或組織形態、不破壞其內部核酸結構的情況下，用標記的探針與核酸進行雜交，然后在顯微鏡下將待測靶核酸在其原有的位置上顯示出來的方法，被稱為原位雜交（In situ hybridization）。由于原位雜交不需要從組織或細胞中提取核酸，在成分復雜的組織中進行單一細胞的研究也不受同一組織中其他成分的影響，故對于組織中含量極低的DNA或RNA分子有較高的敏感性，并可保持組織與細胞的完整性。因此此項技術通常被用于正常或異常染色體的基因精確定位、組織與細胞中某種基因表達位點的確定、轉錄水平的分析及病毒和病原體感染的檢測等。原位雜交具有高度敏感的特點，用放射性標記的RNA探針可檢測到細胞只有20個拷貝的mRNA，所以在細胞生物學、診斷生物學、遺傳學和病理學研究上均得到廣泛應用。
在原有放射性原位雜交技術的基礎上，20世紀80年代末期發展起來一種新的非放射性雜交的分析細胞遺傳學的技術，這種技術就是熒光原位雜交（fluorescence in situ hybridiza—tion，FISH）。與原位雜交的區別在于，熒光原位雜交的探針是用熒光素標記，熒光染料與抗體蛋白結合后方可進行檢測。它具有安全、快速、靈敏度高、特異性好、定位準確、探針能長期保存及可同時顯示多種顏色等優點。FISH已日益發展成為代替常規分子細胞遺傳學的檢測和診斷方法。下面介紹原位雜交的幾個主要操作步驟。